應用：凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質量和相對分子質量分布，同時根據所用凝膠填料不同，可分離脂溶性和水溶性物質，分離相對分子質量的范圍從幾百萬到100以下。近年來，凝膠色譜也廣泛用于小分子化合物。相對分子質量相近而化學結構不同的物質，不可能通過凝膠滲透色譜法達到完全分離純化的目的。凝膠色譜不能分辨分子大小相近的化合物，相對分子質量相差需在10%以上才能得到分離。
原理：凝膠具有化學惰性，它不具有吸附、分配和離子交換作用。讓被測量的高聚物溶液通過一根內裝不同孔徑的色譜柱，柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙（較大）和粒子內的通孔（較�。�。當聚合物溶液流經色譜柱（凝膠顆粒）時，較大的分子（體積大于凝膠孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能從粒子間的間隙通過，速率較快；而較小的分子可以進入粒子中的小孔，通過的速率要慢得多；經過一定長度的色譜柱，分子根據相對分子質量被分開，相對分子質量大的在前面（即淋洗時間短），相對分子質量小的在后面（即淋洗時間長）。溶質的淋出體積與其分子量有關，分子量愈大，其淋出體積愈小。
a. 常溫流動相: 水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈；
b. 高溫流動相：DMF（80℃），三氯苯；
c. 可以測相對分子量的流動相：水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈、三氯苯
d .可以測絕對分子量的流動相：水相、THF、DMF、三氯苯
不同流動相對應的分子量范圍：DMF：3000-100萬；THF：500-200萬；水相：300-50萬；氯仿相：500-200萬。分子量接近限值的，測試不太準確，低于下限會跟溶劑峰連在一起測不準。
1．樣品量：可為液體、粉末、塊狀樣品，粉末樣品10mg，液體5-10ml；
2．要求在指定流動相中有較好的溶解性，送樣前需要自行確認好樣品在指定流動相中的溶解性，難溶樣品自行溶好再送樣, 溶解后的樣品要透明均一，過濾頭不堵；如果樣品溶解性較差，要求提前溶解好（濃度要求在2-5mg /ml左右），或者提供合理溶解方法（如果由實驗室溶解，費用問題請提前咨詢）
3．樣品溶好之后，有機相樣品需要過0.45 μm濾膜，水相樣品需要過0.22 μm濾膜，樣品濃度一般控制在2-5 mg/mL；樣品溶好過濾膜后，可能會損失部分樣品信息，建議送粉末；
4．高溫相要保證在該測試溫度下樣品不分解；并樣品不能含F，含F會分解污染柱子
1. 為什么樣品要求在指定流動相中溶解性要好？
因為GPC（凝膠滲透色譜）本質上是一個色譜測試，是通過色譜柱分離不同分子量的成分，溶解性不好的話是需要過濾后測試的，不溶成分的分子量就無法測試，而且如果樣品溶解度差的話，樣品有可能會在色譜柱析出，毀壞柱子
2. 為什么測試結果跟預期分子量差別較大？
第一，gpc的測試原理是每種流動相都有對應的一種標準物質作出的標準曲線，樣品測試結果要跟標曲比較，然后得出測試結果，所以大多數流動相得到的結果是樣品的相對分子量，如果樣品跟標準品差別太大的話，測試結果就有可能跟真實值相差較大；第二，GPC一般測試樣品都是聚合物，預期分子量只是基于實驗設計的一個預期值，所以有時候跟實際情況有出入也是正常的。
3. 相對分子量和絕對分子量的區別？
第一，測試原理不同：相對分子量時通過建立標準物質的標準曲線，待測樣品與之相比得到分子量分布；絕對分子量是通過三聯檢測器，主要是激光檢測器在樣品顆粒表面散射角度不同通過數學模型計算分子量分布；第二，檢測器不同：相對分子量主要是折光示差檢測器，絕對分子量需要示差、粘度、光散射三聯檢測器；第三，檢測分子量范圍不同：相對分子量可以檢測較小分子量，而一般分子量在幾萬以上才適合絕對分子量
GPC各個流動相之間有什么差別？
不同流動相對應分子量范圍不同：DMF:3000-100萬；THF：500-200萬；水相300-50萬；氯仿500-200萬。高溫相要保證在該測試溫度下樣品不分解，目前高溫流動相是三氯苯相，是針對高溫溶解后降溫會析出的樣品，如果溶解后降溫不析出樣品可測常溫GPC。
